四种酵母培养基的配方与操作步骤

主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH，药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

摘要：四种酵母培养基的配制方法与原理，主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。

本文主要介绍了四种酵母培养基的配制方法与原理，主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。具体如下：

一、基本原理

麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基，马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基，而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。

二、实验材料

(1)药品

葡萄搪、蔗糖、NaN03、、KCl、MgSO4·7H2O，FeS04、琼脂。

(2)仪器

天平、高压蒸汽灭菌锅。

(3)玻璃器皿

移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。

(4)其他物品

药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

三、实验内容

(一)麦芽汁培养基的配制

1.培养基成分：新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

2.配制方法

(1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。

(2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。

(3)糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20ml，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。

(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH至6.4。如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。

(5)如配固体麦芽汁培养基时，加入2%琼脂，加热融化，补充失水。

(6)分装、加塞、包扎。

(7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

(二)马铃薯葡萄糖培养基的配制

1.培养基成分：马铃薯20g、葡萄糖2g、琼脂1.5-2g、水100ml、自然pH

2.配制方法

(1)配制20%马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g，切成小块，加水。80℃浸泡lh，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。100Pa灭菌20min。即成20%马铃薯浸汁，贮存备用。

(2)配制时，按每100ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水。

(3)分装、加塞、包扎。

(4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

(三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制

1.培养基成分：黄豆芽10g、葡萄糖5g、琼脂1.5-2g、水100ml、自然pH

2.配制方法

(1)称新鲜黄豆芽10g，置于烧杯中，再加入100ml水，小火煮沸30min，用纱布过滤，补足失水，即制成10%豆芽汁。

(2)配制时，按每%豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化，补足失水。

(3)分装、加塞、包扎。

(4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

(四)察氏()培养基的配制

1.培养基成分：蔗糖3g、.3g、.1g、KCl0.05g、MgSO4·7H2O0.05g、.001g、琼脂1.5-2g、蒸馏水100ml、自然pH

2.配制方法

(1)称量及溶化量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaNO3、、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培养基加入1ml0.1%的FeS04溶液。

(2)定容候药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。

(3)加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。

(4)分装、加塞、包扎。

(5)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

注意事项：这四种培养基的配制无需用酸或者碱调节pH，灭菌20分钟足够了，时间过长容易把培养基成分破坏掉，太短了容易造成污染。